| 更新時間： | 2025-02-05 |
| 訪問量： | 2797 |
| 廠商性質(zhì)： | 生產(chǎn)廠家 |
提供商: 上海研謹生物服務(wù)名稱: 細胞生長曲線測定的原理和方法規(guī)格: 細胞生長曲線的測定 價格： 300元收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
細胞生長曲線的測定實驗?zāi)康?/span>：
掌握繪制細胞生長曲線的原理和方法。
細胞生長曲線的測定背景與原理：
生長曲線是測定細胞生長數(shù)的常用方法，也是判定細胞活力的重要指標，是培養(yǎng)細胞生物學特性的基本參數(shù)之一。--般細胞傳代之后，經(jīng)過短暫的懸浮后貼壁，隨后渡過長短不同的潛伏期，即進入快速生長的指數(shù)生長期。在細胞達到飽和密度后，停止生長，進入平臺期，然后退化衰亡。為了準確描述整個過程中細胞數(shù)目的動態(tài)變化，需連續(xù)對細胞進行計數(shù)。通常計數(shù)6天。為準que起見，一般每次實驗設(shè)3個平行重復(fù)。
[材料、試劑與儀器]
1、實驗材料:
Hela細胞系。
2、實驗試劑:
DMEM培養(yǎng)基(青霉素，鏈霉素，10%血清) ，0.25%胰蛋白酶溶液， 臺酚藍染液。
3、實驗儀器:
超凈工作臺，CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡，微量移液器，血細胞計數(shù)板，培養(yǎng)瓶，離心管,移液管，廢液缸，蓋玻片, 24孔板。
[方法與步驟]
1、取生長良好的細胞，用培養(yǎng)基制成細胞懸液后計數(shù)。根據(jù)細胞計數(shù)結(jié)果按5x104/mL作傳代培養(yǎng)接種于24孔板中，共接種21孔細胞。1 m/孔。余下三孔可設(shè)傳代培養(yǎng)的對照。
2、24h后每天記錄細胞數(shù)目，每次取3孔細胞，分別進行計數(shù)。計算平均值。連續(xù)計數(shù)7d。細胞用胰酶消化后加入一定量的培養(yǎng)基,混勻制成細胞懸液。取少量懸液與臺酚藍1:1混臺。取一干凈的血細胞計數(shù)板,蓋上蓋片，從蓋片兩邊滴入細胞懸液使之充滿計數(shù)板和蓋片之間。注意滴液勿有氣泡，也不能太多，否則會使蓋片浮起而使細胞計數(shù)不準。
3、低倍鏡下觀察，活細胞不著色，臺盼藍著色的細胞呈深藍色，是不健康或已死亡的細胞，不能計數(shù)。
找出計數(shù)板上的方格，計算四角大格內(nèi)總細胞數(shù)，大格線者只計左側(cè)和上方，不計右側(cè)和下方細胞懸液中細胞
密度計算公式為:細胞數(shù)/mL= (四角大格內(nèi)細胞數(shù)/4) x104x2
4、根據(jù)細胞計數(shù)結(jié)果，以單位細胞數(shù)(細胞數(shù)/mL)為縱坐標，以時間為橫坐標繪制生長曲線。
細胞黏附能力實驗服務(wù)
細胞熒光染料標記檢測實驗
實驗代做服務(wù)：
免疫組化IHC染色實驗服務(wù) | 細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務(wù) | 試劑盒免費代檢測 | 實驗室代做實驗項目
|
透射電鏡服務(wù)實驗服務(wù) | 石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡 | 核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實驗服務(wù) | 免疫共沉淀（CHIRP）實驗 |
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀（RIP）實驗代做 | 酶聯(lián)免疫（ELISA）技術(shù)服務(wù) | 雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒 | 喹諾酮類快速檢測試劑盒 |
組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)
| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務(wù)
| 多因子液相芯片技術(shù)（Luminex）實驗 | 免疫細胞化學ICC實驗服務(wù) |
ATP/ADP檢測實驗服務(wù) | 蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務(wù) | 蛋白相互作用分析 | 堿性磷酸酶染色實驗服務(wù) |
PKC活性檢測實驗 | 非標定量實驗 （Label-free）
| DIGE技術(shù)實驗服務(wù) | 端粒酶活性檢測實驗 |
細胞生長曲線的測定 | 掃描電鏡服務(wù) | NF-KB p65活性檢測實驗
| 慢病毒包裝實驗服務(wù) |
